蛇毒纤溶酶激活剂

一、项目介绍

心血管疾病，特别是血栓是人类疾病中的头号杀手。存在于血浆和组织液中的人纤溶酶原是一个单链92kD的糖蛋白，在Arg561-Val562键被切断以后，形成双链纤溶酶，它的异常将导致一系列临床心血管疾病，如血栓和大出血。

 血栓栓塞性疾病主要有3种：

 1、冠状动脉疾病形成血栓，主要指急性心肌梗死（AMI）；

 2、脑血管疾病形成血栓，即脑血栓中风；

 3、末梢动静脉疾病形成血栓，即脉管栓塞。

 目前，t-PA已成为世界上治疗心肌梗死的重要药物。其基因工程产品仅在美国每年就高达5亿美元产值。目前世界上应用的血栓药物均具有价格高，受生理抑制剂抑制、半衰期短、体内出血率高等副作用，而蛇毒蛋白酶具有与生理激活剂相同的功能，但却具有不受生理抑制剂抑制、半衰期长的优点。因而，蛇毒蛋白水解酶是一类开发新的心血管溶栓药物的极好材料。

 我们首次发现并纯化的蛇毒专一纤溶酶原激活剂（TSV-PA）为一单链糖蛋白。TSV-PA不直接水解纤维蛋白原，它切断人纤溶酶原Arg561- Val562键形成双链纤溶酶，其作用机理与t-PA一致。目前世界上仅从中国竹叶青蛇毒中测定纯化出纤溶酶原激活剂TSV-PA。研究工作表明其具有良好的体内溶栓效应，和其它蛇毒溶栓剂，如安克洛酶（ancrod），去纤酶（difibrase）相比，不引起体内纤维蛋白原含量降低，也未发现出血现象。具有潜在和诱人的临床应用前景。

 TSV-PA的含量仅占蛇毒蛋白含量的0.4%，从1克竹叶青蛇毒中仅能纯化得到2毫克TSV-PA，而竹叶青蛇毒的价格昂贵，来源稀少成为TSV-PA开发利用的最大困难。因而利用基因工程技术制备TSV-PA成为其临床开发利用的必然手段。我们已将TSV-PA基因高表达于大肠杆菌中，蛋白复性率达20%，从每升培养液中可得到150mg纯化的重组TSV-PA。大肠杆菌表达的TSV-PA无糖基化，但小肽底物水解活性测定和纤溶酶原激活活性测定表明其具有天然TSV-PA的同等活力。可以开发成生物技术药物。基因工程TSV-PA的中试工艺已完成。

二、合作方式

    技术转让，合作开发。